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Enzymatic Recombinase Amplification (ERA )

O sistema principal de amplificação isotérmica de recombinação foi obtido através de técnicas avançadas de design molecular e evolução dirigida, para obter enzimas altamente eficazes e um conjunto tecnológico único e patenteado de distribuição exclusiva da ERA Assays do Brasil.

Através da tecnologia ERA é possível amplificar especificamente fragmentos de DNA a uma temperatura constante entre 30-45 ℃, a partir de moléculas únicas. Tendo sua temperatura ótima próxima à do corpo humando, o processo de amplificação leva apenas 5-15 minutos isotermicamente. Sua adaptabilidade a baixa temperatura e sensibilidade trazem avanços revolucionários para detecção de ácidos nucleicos.

Mecanismo ERA

O princípio da amplificação de ácido nucleico da ERA baseia-se na formação de complexos proteína-DNA, constituídos por recombinases e iniciadores, que se associam e localizam sequências de dupla fita complementares. Essa associação promove a abertura da dupla hélice de DNA, permitindo a translocação de loci homólogos e o início da síntese de novas fitas de DNA, catalisada por proteínas de ligação a fita simples (SSBs). O processo resulta em uma amplificação exponencial da sequência alvo, rápida e exata em condições isotérmicas.

A combinação de técnicas de hibridização de sondas marcadas ou de técnicas baseadas em CRISPR/Cas permitem a detecção específica, qualitativa e quantitativa do produto de amplificação permitindo inclusive a diferenciação de SNPs. Através de nossa plataforma nossos parceiros podem ter acesso a ensaios já desenvolvidos ou ter o suporte para o desenvolvimento do seu próprio teste.

Comparativo das técnicas

ERA

LAMP

PCR

qPCR

Temperatura da Reação

37-42°C

65°C

95-55°C

95-55°C

Tempo da Reação

5-20 min

45-60 min

1,5h

2h

Sensibilidade

Alta

Alta

Moderada

Alta

Operação

Simples

Simples

Complexa, necessita de profissionais treinados

Complexa, necessita de profissionais treinados

Precisão

Alta

Frequentemente falsos positivos

Facilmente contaminada por aerossóis

Alta

Custo

Moderado

Alto

Moderado

Moderado a alto

Equipamento Necessário

Fluorímetro de temperatura constante

Fluorímetro de temperatura constante

Termociclador PCR, equipamento de eletroforese, leitor de gel

Termociclador qPCR em tempo real

Princiapais Vantagens

01
01
Rápido e Fácil de Operar

Resultados em 15 minutos

02
02
Alta sensibilidade

capaz de detectar de 1-10 cópias.

03
03
Resistente a Inibidores

Preparação simples da amostra antes da reação.

04
04
Amplificação isotérmica 35-45ºC

Compátivel com diversos equipamentos